植物基因转化常用方法 - 廊坊市农林科学院
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    64942 阅读 2012-07-26 发布时间

     

    植物基因转化常用方法 
      基因克隆技术提供了一种新的改良植物的方法它可以直接的改变植物的基因型。有两种策略可以应用,一是基因附加:通过添加个或多个基因改变植物的性状。二是基因扣除:利用基因工程技术使一个或多个植物已经存在的基因失活。
    基因添加通过植物遗传转化技术实现,可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高,广泛应用于双子叶植物的遗传转化。
    基因附加的方法以抗虫基因为例来说明在农业生产中危害最严重的是昆虫为了减少损失,一般使用杀虫剂。大部分杀虫剂没有选择性,杀灭害虫的同时也消灭了天敌,同时对生物圈中的其生物产生影响,污染环境。理想的杀虫剂具有的特性它必须对害虫有害,但毒性有选择性杀虫剂能够降解,作物收获后不存在残留,并且对环境无污染可以保护整个植株,不单是地上部免受害虫危害到目前为止,还没有发现这样的理想杀虫剂,苏云金杆菌BT基因发现解决了这一难题。苏云金杆菌在孢子形成的过程中,细胞内形成杀虫晶体蛋白,其活性很强,有时要比有机磷毒性高八万倍,而且不同的毒蛋白具有很强的选择性。昆虫食用后,毒素被蛋白酶消化后结合到昆虫肠道内,破坏表皮细胞,使昆虫不能进食,从而饥饿而死。BT毒蛋白基因的遗传转化多通过农杆菌介导法完成,通过遗传转化BT基因整合进植物基因组中并得以表达,害虫在取食任何一个部位后都会死亡或生长发育受到明显抑制。
     
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