在番茄杂交育种工作中，其中最重要的环节之一就是授粉。授粉的好坏不仅决定了收获种子数量的多少，而且还决定了种子纯度的大小，特别是在新种质创制过程中，严把授粉环节关，杜绝混杂现象的发生，一定程度上缩短了新种质创制及新品种培育的年限，其主要环节包括以下几个方面。

一、母本中需去雄花蕾的选取。

番茄人工授粉，一般采用蕾期授粉，选取合适的花蕾是严把授粉关的关键。选取的花蕾小，一方面不好去雄，另一方面，雌蕊尚未发育完全。因此，花蕾过小，雌蕊很难授上粉；选取的花蕾过大，特别是那些长柱花，可能已经授上粉了，在人工授粉后，就很难选取目标性果实，出现混杂现象，育种过程中会出现偏差。所以，授粉时需选取适宜大小的花蕾进行去雄。所谓适宜花蕾，即花蕾将开裂，雌蕊柱头未伸出，第二天能够完全开放的花蕾。

二、去雄套袋

去雄时，选取需去雄的花穗，将合适的花蕾留下，其余花蕾全部去除，花蕾一定要清除干净。去除雄蕊时，用尖针镊子顺着花瓣裂缝处底部插入，向上将花蕾挑开，然后将花瓣轻轻剥下，注意动作要轻，不要伤了雌蕊，然后将雄蕊一个一个的背离雌蕊方向拉下。待一穗花上选取的适宜花蕾全部去雄后套袋。

三、取粉

采用电动取粉仪，插入取粉纸槽，选取当天刚开的番茄花震动取粉，取粉后将取粉纸槽拉出，换上新的纸槽。注意，不同父本应采用不同的取粉仪进行取粉，如果取粉仪不够用，需要在取完一个父本的粉后，用75%的酒精对取粉仪的取粉头进行消毒后才能使用，严禁同一取粉仪不经消毒随意取不同父本的花粉。

四、授粉

将去雄的花蕊的套袋取下，观察雌蕊柱头，柱头明显膨大且发亮的，说明雌蕊处于最佳授粉期，用去雄的雌蕊柱头在取粉纸槽内蘸取花粉，柱头膨大部分变黄即可，注意柱头蘸取花粉时，需均匀而且整个柱头都有花粉，以防出现歪果，影响种子的数量。授粉后，把套袋继续套上封严，挂上标识牌。授粉后的雌蕊，3天后，通过观察雌蕊的膨大情况即可判断其授粉情况，授好粉的，整个雌蕊膨大，形成小的果实胎基，未授好粉的，雌蕊没有明显的发育。